執(zhí)照.jpg)
胰蛋白酶-EDTA 溶液(0.05%:0.02%,含酚紅)
胰蛋白酶(Trypsin)是由胰臟產(chǎn)生沒有活性的胰蛋白酶原分泌到小腸后，小腸內的腸肽 酶會活化該酶原，形成胰蛋白酶。胰蛋白酶的特點在于已經(jīng)活化的胰蛋白酶，能夠繼續(xù)活化更多胰蛋白酶原，這種過程即自動催化。胰蛋白酶在小腸工作，它會將蛋白質水解為肽，進 而分解為氨基酸，其適溫度約為37℃。Ø Trypsin-EDTA solution(0.05%:0.02%,含酚紅)由 0.05%胰酶、0.02%EDTA、少量酚紅等組成，經(jīng)過濾除菌。本試劑可以直接用于培養(yǎng)細胞的消化，或者一些組織的消化，通常室溫下 1～2min 左右就可以消化下大多數(shù)貼壁細胞。
產(chǎn)品組成：
Trypsin-EDTA solution(0.05%:0.02%,含酚紅) 100ml -20℃
自備材料：
1、 PBS、Hanks液或無血清培養(yǎng)液
2、 顯微鏡
3、 離心機
操作步驟(僅供參考)：
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養(yǎng)液，用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次，以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution，略蓋過細胞即可，室溫放置 0.5～2min， 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察，細胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化；或者用槍吹打細胞發(fā)現(xiàn)細胞剛好可以被吹打下來，吸除胰酶細胞消化液。加入含血清的 *細胞培養(yǎng)液，吹打下細胞，即可直接用于后續(xù)實驗。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足，則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細胞消化時間過長，未及吹打細胞，細胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落， 直接用胰酶細胞培養(yǎng)液把細胞全部吹打下來。1000～2000g 離心 1min，沉淀細胞，盡量
去除胰酶細胞消化液后，加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細胞，即可用于后續(xù)實驗。
2、組織的消化
不同的組織需要消化的時間相差很大，通常以消化后可以充分打散組織為宜。
注意事項：
1、 盡量減少反復凍融的次數(shù)，以免失效。
2、在使用 Trypsin-EDTA solution 過程中，要特別注意避免消化液被細菌污染。
3、Trypsin-EDTA solution 消化細胞時間不宜過長，否則細胞鋪板后生長狀況會較差。
4、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
有效期： 12 個月有效。
